一、植物細(xì)胞試驗(yàn)原理
植物的性:植物體的任何一個(gè)細(xì)胞都具有生長(zhǎng)分化成為一個(gè)完整植株的才能,稱(chēng)為植物的性。
植物安排培育便是利用植物的性進(jìn)行離體無(wú)菌植物培育的一門(mén)技術(shù)。
植物安排培育按其原始意義,便是指愈傷安排培育。但開(kāi)展至今,其范圍日益擴(kuò)大,已包括植物和它的離體器官、安排、細(xì)胞和原生質(zhì)體的離體無(wú)菌培育。
二、試驗(yàn)?zāi)康?br />植物細(xì)胞和安排培育的技術(shù)性強(qiáng),要求無(wú)菌操作,通過(guò)本試驗(yàn)可初步掌握慣例的安排培育技術(shù),加深對(duì)無(wú)菌操作的了解。
三.試驗(yàn)資料
儀器設(shè)備:1.酒精燈、三角燒瓶,培育皿;2.鑷子、剪刀、剖針;3.雙筒解剖顯微鏡;4.光照培育箱或溫室;
資料煙草無(wú)菌苗、豌豆幼苗。
試劑
(1)MS培育基,植物激素:NAA、6-BA等;
(2)飽滿(mǎn)漂液(次氯酸鈉);
(3)70%酒精、100%酒精、酒精棉球;
(4)無(wú)菌水
四.植物細(xì)胞試驗(yàn)過(guò)程
豌豆苗的莖尖培育
① 取發(fā)芽6天的豌豆幼苗10株,簡(jiǎn)取1厘米左右的莖尖,浸入70%的酒精中1分鐘,再浸入飽滿(mǎn)次氯酸鈉溶液中消毒15分鐘,(此步今后要求無(wú)菌)用無(wú)菌水中沖刷5次,在滅菌的濾紙上吸干水分,放入滅菌的培育皿中。
② 在雙目解剖鏡下,用滅菌的解剖針剝?nèi)ビ兹~顯露生長(zhǎng)錐,用滅菌的解剖針挑取帶著兩至三個(gè)葉原基的生長(zhǎng)錐。
③ 將挑好的莖尖移到MS+10.7μmol/L萘乙酸(NAA)+4.4μmol/L6-芐基腺嘌呤(6-BA)的培育基上誘導(dǎo)愈傷安排構(gòu)成,用封口膜將培育皿封好。
④ 在恒溫培育箱中,26℃下,培育六周,構(gòu)成愈傷安排,經(jīng)繼代后,可用于生根培育